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双抗胶原膜引导牙周组织再生的实验性研究
作者:付云 李成章 樊明文  时间:2008-03-27 13:12:58  点击:432次

[摘要] 目的:观察双抗胶原膜(BACM)引导周组织再生的疗效。方法:在狗下颌牙P2——P4区建立急性牙周缺损模型,放置BACM于缺损区 域,行引导牙周组织再生术。以常规翻瓣术为对照。结果:实验组再生牙 周组织量显著多于对照组。结论:BACM引导牙周组织再生效果切实可靠。
[关键词] 胶原膜; 四环素; 引导牙周组织再生

  在影响引导牙周组织再生(guided periodontal tissue regeneration GPTR)疗效的众多 因素中膜材料性能至关重要。本实验在双抗胶原膜(bianticollagen membrane, BACM) [1]实验研究的基础上,进一步 观察该膜在动物急性牙周缺损模型中引导牙周再生的结果,为其今后应用于临床提供组织学 依据。

材料与方法

  1. 双抗胶原膜的制备:参照李成章法进行[1]
  2. 方法:选成年健康雄性狗4只,0.25%硫贲妥钠1mg/kg静脉麻醉。常规消毒后,沿下 颌龈沟切开并翻起P2——P4区颊侧面粘骨膜瓣,去除该区部分颊侧牙槽骨,至釉牙骨质界下 3~4mm,刮净缺损区根面牙周韧带和牙骨质,并在缺损底部牙体上制备切迹,作为组织学测 量的基线。将经紫外线消毒的BACM剪成合适形状,覆盖于右侧缺损区域。膜的上端略低于龈 缘,下端覆盖牙槽骨1~2mm。左侧为对照组,不放膜。小心复位龈粘骨膜瓣,间断缝合。术 后每只动物每天肌肉注射庆大霉素8万u,连续三天,饲软食2周。10周后处死动物 ,取其标本用10%中性福尔马林固定,常规脱水、包埋、连续切片,切片厚度约5~6μm。HE 和VG染色,光镜下作组织学观察。
  3. 组织学测量指标 将切迹底部定为A点,结合上皮底部为J点,釉牙骨质界定为O点, 新生牙槽骨和牙骨质顶部分别定为B点和C点。则:OA:骨缺损高度,BA:新生牙槽骨高度, CA:新生牙骨质高度,JA:结合上皮底部至切迹底部的距离。(见图1)

 

图1 组织学测量示意图

结 果


  1. 临床愈合情况:两组动物术后10周伤口完全愈合,少数部位仍有缝线存在。牙龈形态、 色泽、质地及龈牙结合关系与正常部位一致或接近,无龈退缩现象发生。
  2. 组织学观察:实验组可见大量再生组织,新生牙骨质在根部牙本质表面从切迹底部 向冠方延伸,逐渐变薄;新生牙槽骨呈层状,较成熟,形态不太规则,呈弧形凸向切迹(图 2);新生牙周纤维细小、稠密、富含血管,其方向与根面垂直或接近垂直(图3),与正常 牙周韧带结构相似。对照组有少许新附着和新生牙槽骨形成(图4),主要位于切迹内,结 合上皮增生明显,形成长结合上皮。胶原纤维细小、疏松,与根面基本平行。牙根吸收在两 组均有出现,但实验组中较少发生。其表现为:在牙骨质一牙本质界处,有扇形或凹形缺损 ,骨性粘连未见发生。

 

图2 实验组组织愈合情况

 

图3 实验组新生牙周组织

 

图4 对照组牙周组织愈合情况

3. 组织学测量:组织学测量结果见附表。经统计学处理,两组中BA、CA、JA值均有显 著性差异(P < 0.05)。表明实验组中牙骨质及牙槽骨再生的高度显著多于对照组,而 结合上皮长度则显著降低。

GPTR术后10周组织测量结果(±s mm)
组别 OA BA CA JA
实验组 3.38±0.28 1.37±0.19* 2.42±0.11** 2.75±0.13**
对照组 3.27±0.45 0.45±0.23 0.67±0.18 0.92±0.16
 

注:t检验 P<0.05  P<0.01
讨 论

  目前,GPTR材料学发展的趋势是进一步研制和开发可降解性膜[2]。在众多可降解 性材料中,胶原一直备受关注。Quleishi等[3]的研究表明:与胶原材料种植有关 的炎症反应轻微且将最终消失。但胶原在GPTR应用中却存在降解速度过快及易被细菌粘附等 问题[4]。细菌粘附所引发的慢性炎症导致组织结构发生改变,影响愈合。同时, 细菌性胶原酶还能加速膜的降解。
  BACM为一种含四环素的胶原膜,该胶原膜经戊二醛交联,具有较高的交联度和较强的抗酶 解能力,其网孔结构有利于引导牙周组织再生,在体内可维持4周左右[5,6]。加 用四环素可进一步使其具有抗菌斑,延缓体内降解之功效。四环素作为一种能同时抑制细菌 及细菌性胶原酶的广谱抗菌 素,能与根面结合,并随后从牙本质中释放出来,在至少48小时内维持抗菌活性[7] 。因此,四环素在GPTR中的运用理论上能弥补胶原膜之不足,促进牙周组织再生,

  目前牙周组织再生治疗常将GPTR与其他再生手段相结合[8,9]。Trombelli等 [7,10]根面及纤维蛋白纤维连接蛋白系统的应用能显著提高龈退缩 治疗水平 ,改善再生效果。同这一联合再生技术相比,BACM的应用不仅能简化治疗程序,且能使四环 素缓慢释放,长时间发挥作用。本研究结果提示:BACM在设计上具有合理性,在临床应用中 存在可行性。
  一般GPTR术后牙龈会伴有轻度炎症,牙龈的临床愈合要较翻瓣术稍差。这主要是因为外源性 材料所引发的炎症反应及细菌对膜的粘附所致[11]。本实验中,BACM组同对照组 一样,具有 良好的龈牙结合关系,表明膜中四环素对牙周细菌的抑制能提高牙龈愈合水平,改善GPTR疗 效。

[基金项目]湖北省教委基金资助,编号:96C04
[作者简介] 付云(1964~),男,湖北人,主治医师,硕士 ,牙周病学专业。现在广州光华口腔医院牙周科工作。
付云(湖北医科大学口腔医学院, 湖北 武汉 430079)
李成章(湖北医科大学口腔医学院, 湖北 武汉 430079)
樊明文(湖北医科大学口腔医学院, 湖北 武汉 430079)

参考文献

[1] 李成章,樊明文. 双抗胶原膜的研制和特性分析. 中华口腔医学杂志,1997 .32:369~371
[2] Hardwick R, Hayes BK, Flynn C. Device for dentoalveolar regenerati on An up-to-date literature review. J Periodontol, 1995,66:495~505
[3] Quteish D, Singrao S, Dolly AE. Light and electron microscopic eva luation of biocompatibility resorption and penetration characteristics of human collagen graft material. J Clin Periodontol. 1991; 18:305~311
[4] Tempro PJ, Nalbandian J. Colonization of retrived polytetrafluoroe thy lene membrane: microbiological and morphological observation. J Periodontol 1993; 64:162~171
[5] 李成章,樊明文. 冻干交联胶原膜的制备和特性分析. 口腔医学纵横,1996 ,12(3):135~137
[6] 李成章,樊明文. 冻干交联胶原膜的制备和特性分析Ⅱ. 口腔医学纵横,19 97,13(2):67~69
[7] Trombelli L, Schincaglia G, Checchi L, et al. Combined guided tis su e regenration, root conditioning and fibrin fibronectin system application in th e treatment of gingival recession: A 15-case report. J Periodontol 1994;65:796~ 803
[8] Park JB, Matsuura M, Han KY,et al. Periodontal regeneration in Cl ass Ⅲ furcation defects of beagle dogs using guided tissuee regenerative therap y with platelet-derived growth factor. J Periodobtol 1995; 66:462~477
[9] Chen CC, Wang JL, Smith F,et al. Evaluation of a collagen membran e with and withort bone grafts in treating periodontal intrabony defects. J Perio dontol 1995; 66:838~847
[10] Trombelli L, Schincaglia GP. Zangari F,et al. Effects of tetracy c line HCL Conditioning and fibrin-fibronectin system application in the treatment of buccal gingival recession with guided tissue regeneration. J Periodontol 199 5; 66:313~320
[11] Kon S, Ruben MP, Bloom A,et al. Regeneration of periodontal liga m ent using resorbable and nonresorbale membranes: clinical, histological and hist ometric study in dogs. Int J Periodontics Restorative Dent. 1991; 11(1):59~71

       来源:口腔医学纵横

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