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PhoeHix脓肿根管渗出液中白介素—1a的检测
作者:不详  时间:2008-12-23 14:21:40  点击:298次

    [摘要]  目的  比较Phoenix脓肿治疗前后根管渗出液中白介素—1a(1L-la)浓度的变化。方法  选择临床诊断为Phoenix脓肿的单根管恒牙40颗,按就诊时间分为初诊组和复诊组,记录临床症状和体征,摄X线片,AutoCAD软件测量X线片根尖阴影面积,常规进行根管治疗,初、复诊病例均用标准纸尖法收集根管渗出液,并计算渗出液体积。用临床根尖周指数(CPl)进行疗效评定;渗出液中的IL-1a。浓度用酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法检测。所得数据用SPSS l0.0软件进行分析。结果  初诊组IL-1a浓度与渗出液体积、根尖阴影面积呈负相关(p=0.001,0.002),Phoenix脓肿治疗过程中其根管渗出液中的IL1a浓度增加(p<0.001)。结论  IL-la与Phoenix脓肿的愈合过程有关。
    白介素—1(interleukin 1,IL—1)是一种多功能细胞因子,参与了休克、关节炎、骨质疏松、结肠炎、白血病、动脉粥样硬化等多种疾病的发病过程。IL-1是一个多肽家族,包括IL-1a、IL-1B和IL-l受体拮抗剂。IL-la、IL-lB是由不同基因编码的多肽分子,识别结合相同的受体并具有基本相同的生物学活性,二者的生物学活性可被其受体拮抗剂阻断。近年来研究表明IL-1B与根尖周炎及骨吸收的关系十分密切,并在其发病机制中起重要作用「1」。但有关ID-la与根尖周炎关系方面的临床研究报道较少。本实验采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immu-
nosorbent assay,ELISA)检测Phoenix脓肿「2」(慢性根尖周炎急性发作)根管渗出液中IL-la的浓度,探讨IL-la在根管治疗过程中的变化规律及其与临床的联系。
    1 
材料和方法
    1.1  病例选择
    选择来自本院牙体牙髓科门诊,诊断为Phoenix脓肿的单根管恒牙40颗,其中男18例,女22例,年龄19—71岁(平均38.4岁),按就诊时间分为初诊组和复诊组。所有受试者均无系统性疾病,近3个月未用过抗生素或免疫抑制剂。
    1.2  X线检查
    X线片均用柯达E速双胶片,标准角度投照,投照强度为70 kV。
    根尖阴影面积的测量:用Photoshop 7.0软件和EPSON扫描仪(日本爱普生公司,型号:Perfection1200 PHOTO,分辨率300 dpi)等比例扫描,并存储为位图文件,用AutoCAD 2002软件测量根尖阴影面积(mm2),每一张x线片均由三位专科医生分别进行测量,取均值。
   1.3  临床检查   
   症状和体征:主要记录自发痛、咬合痛、叩痛、扪痛、根尖区红肿、瘘管、
牙齿
松动度和全身反应(有无低热)等临床参数,初、复诊检查项目一致。
    Phoenix脓肿诊断标准「2」:患牙有急性根尖周炎临床表现,X线片上根尖区有骨质破坏影像。
    疗效评定标准「3」:采用临床根尖周指数(clinical periapical index,CPl)客观评价根尖周炎症程度,分值如下:0为无自觉症状;1为轻微自发痛,不影响咬合和进食,叩痛(±~+);2为中—重度自发痛,有咬合痛、叩痛(++—+++),根尖区红肿或有瘘管形成。
    1.4  根尖渗出液样品收集
    无菌条件下常规干燥、隔湿,开髓,慢钻揭顶,用根管长度测量仪ROOT ZX确定工作长度并扩大根管至30#,30#标准纸尖(德国Dentsply公司提供)插入根管达工作长度,放置30s,取出纸尖观察表面有无脓性分泌物,并记录纸尖湿润长度,将纸尖湿润端剪人含有200 ul标本稀释液的无菌KP管中,4℃离心(4000r/min,30min),取上清液,—70℃冻存。常规治疗7 d后复诊重复取样1次。

    1.5  样品体积测定
    制作30#标准纸尖吸液体积与湿润长度关系的标准曲线(所用液体为正常人血清),求出回归方程Y=0.007X2十0.0111X(r2=0.991),用此方程将纸尖湿润长度换算成样品体积。
    1.6  IL-1a的检测
    全自动ELBA阅读计:美国Bio—Tek仪器公司生产,型号:ELX800。IL-la试剂盒:购自法国DIA-CIDNE公司。方法:用ELISA双抗体夹心法复管检测上清液中IL-la浓度,并换算成根管渗出液中的浓度。
    1.7数据处理和分析
    Microsoft Access建立病例数据库,SPSSl0.0统计软件分析.
    2  结  果
    所有初、复诊组根管渗出液样品中均检出IL-1a,检出率100%。初诊组经二元变量的相关分析表明,IL-la浓度与自发痛时间之间有正相关性(p=0.042,Pearson相关系数=0.281),与根尖阴影面积之间有负相关性(p=0.002,Pearson相关系数=—0.483);逐步回归分析表明,IL-la浓度与渗出液体积、有无瘘管相关(B=—0.149,7.027,p=0.001,0.007)。
    Phoenix脓肿初、复诊间CPI指数和IL-la浓度的比较见表1,所有Phoenix脓肿病例经常规治疗后临床症状明显缓解,CPI指数明显下降(X2=46.14,p<0.001),初、复诊组间的IL-la浓度均值比较差异有显著性(p<0.001)。

表1  Phoenix脓肿初、复诊期间CPI指数和IL-1a浓度的比较

  

  两组比较*p<0.001

    3  讨  论
    根管渗出液是根尖周病中常见产物,其可为动态免疫学评估研究根尖周病的宿主反应提供物质基础。大量的研究表明,IL-la是根尖周炎症组织的局部产物,其活性仅表现在根尖周局部炎症区域,患者血清中无IL-la活性「4」。
    在Phoenix脓肿治疗过程中,复诊组IL-la浓度明显高于初诊组,表明IL-la与急性根尖周炎的缓解程度有关。这主要由于一方面随着急性期炎症反应的消除,根尖周局部的单核细胞逐渐发育成熟为巨噬细胞,而单核细胞主要产生IL-1B,巨噬细胞主要产生IL-la,所以在炎症后期IL-la浓度上升以替代被免疫反应清除掉的IL-1B活性「5」。另一方面,由于IL-la是细胞结合型调节因子而不是可溶性调节因子,随着炎症程度减轻和临床症状的缓解,根尖周炎性渗出减少,黏度增加,黏性渗出液中含有较多结合有IL-la的细胞碎片,在IL-la检测过程中,随着细胞的解体,其细胞膜上的IL-la不断溶解,增加了渗出液中IL-la的浓度「6」。
    初诊组渗出液中IL-la浓度与渗出液体积之间呈负相关,即炎性渗出少的根尖周炎中IL-la浓度较高,有瘘管的根尖周炎中IL-la浓度较高。炎性渗出减少和瘘管的形成均是炎症慢性化的重要标志,这进一步说明了IL-la浓度与根尖周炎症的缓解有关。IL-la浓度与根尖阴影面积之间呈负相关,即阴影面积较小的根尖周炎渗出液中含有较高浓度的IL-la,提示IL-la可能参与了人根尖周炎症的骨质修复。
    根尖周炎是根管微生物与被感染宿主多重应答相互作用的结果。本研究显示,在急性根尖周炎缓解过程中,局部产生的IL-la浓度发生变化,其浓度升高与临床症状的改善相关,提示根尖周局部IL-10的宿主反应可能影响急性根尖周炎的转归。
    结合我们「7」以往的研究可以认为,IL-la、IL-lB是根尖周炎症的局部分泌产物,在根尖周炎症发展过程中,IL-la和IL-1B的作用有所不同,分别作用于根尖周炎的不同阶段,IL-1B主要显示免疫刺激活性,与人根尖周炎的活动期和骨质破坏有关,而IL-1a能有效地控制IL-lB的免疫活性,与人根尖周炎症的缓解和骨质修复有关。

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